在细胞培养过程中,水占据着非常重要的地位,因为细胞赖以生存的培养基中,90 %以上的成分是都是水。水里污染物的成分组成,含量高低都会直接影响到培养基,影响到敏感的动物细胞的代谢、结构和表型稳定性。
据报道,国内的自来水原水中有机物和重金属污染严重,水中的有机物比如(腐殖酸、单宁酸和农药)会影响细胞培养,重金属也对细胞有不良影响,影响细胞的生长、形态或行为,水中的微生物还会释放内毒素、导致细胞培养基酸碱度改变及失去营养、诱导细胞死亡等等。
为了防止杂质对细胞培养基的污染,培养基配制用水应该符合《中国药典》2020年版四部中注射水或纯化水的标准,其中有机碳含量(TOC)不高于0.5mg/L(通则0682),而且必须不含有内毒素。
基于现今对实验的重复性要求越来越高,我们更需要高质量稳定可靠的实验室纯水系统,为实验提供高品质纯水。为了更好地培养细胞,超纯水是必不可少的。
# 超纯水 #
超纯水的获取方式一般是以自来水作为水源,通过预处理得到纯水,再进一步纯化得到超纯水。
涉及到的技术包括自来水预处理,RO反渗透、离子交换树脂、EDI连续电去离子、活性炭、紫外杀菌等。
如果是以自来水为进水水源,我们推荐可以选用默克Milli-Q的IQ70XX系列水机,解决细胞培养中对水质的高要求。
推荐这个系列,有几个需要考虑的点:
Milli-Q IQ70XX有IQ7003,IQ7005,IQ7010和IQ7015,分别代表每小时3L/5L/10L/15L的纯水产水量。
水箱有25L/50L和100L可选,在水箱可供水的情况下,超纯水的产水流速是2L/min。使用者可以根据具体的实验用水量来选择。
细胞培养要求高,水中不能含有颗粒和微生物,我们知道流水不腐,那作为储存纯水用的水箱,如何避免微生物的滋生呢?
Milli-Q IQ70XX的水箱标配ASM(紫外灯自动灭菌),即水箱中的紫外灯能起到灭菌的作用,防止微生物的滋生。
在超纯水的取水口,默克Millipore有独特的Biopak终端精制器,内含聚砜中空纤维,外壳材料为ABS,除截留颗粒外,还可用于截留内毒素、RNA酶、细菌等,专门生产用于细胞培养、生化分析和分子生物学领域应用的超纯水。
IQ70XX具有易于使用的Q-POD超纯水取水手臂以及新型的E-POD纯水取水手臂。一个纯化装置可配置多达4个POD,即使在远处的工作台上也可方便地取用纯水、超纯水。
定量取水,定容取水,耗材使用情况一目了然,是可以不用说明书,简单明了的操作的界面。
当自来水进水水质符合规格要求时:系统正常产水(II级纯水)参数能达到电阻率>5MΩ·cm,通常10-15 MΩ·cm,TOC≤30ppb。
超纯水水质如下:
当纯水和超纯水的取水口配有Millipak或Biopak终端精制器时,其他的参数可达到以下规格:
如果实验室已有纯水系统,那么可以选择Milli-Q IQ7000, 即纯水进水,超纯水出水的超纯水机,其超纯水水质和IQ70XX系列的超纯水水质一样。
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