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蛋白质谱检测

 

蛋白质是生物体中至关重要的分子，其结构和功能对于生命活动具有重要影响。蛋白质谱检测作为一种先进的分析技术，为我们提供了深入了解蛋白质的工具。它不仅可以帮助我们鉴定和定量蛋白质样品，还可以揭示蛋白质的结构、修饰和相互作用等信息，常见的质谱仪器主要有质谱质量分析仪（MS）和液相色谱（LC）等仪器，用于离子化、分离和检测蛋白质样品。

蛋白质质谱鉴定方法通常使用串联质谱（MS/MS）和液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）等方法，其中，简单蛋白样本用MS/MS，混合复杂蛋白样本用LC-MS/MS。两种方法作用原理相似：先将蛋白质利用蛋白酶消化成肽段，肽段在质谱仪中会离子化带上一定量的电荷，离子检测器可以鉴定各肽段的质荷比，从而获知各肽段的相对分子质量；质谱仪会继续打断某些肽段再次分析，生成二级质谱，从而获得肽段的序列信息；通过质谱数据库比对分析，即可鉴定蛋白质。

蛋白质谱检测主要有一下几种应用，生物制品开发：蛋白质谱检测在生物制品的研发过程中起着重要作用，可以帮助鉴定和验证蛋白质产品的纯度、结构和功能；生物标志物鉴定：通过蛋白质谱检测，可以发现与特定疾病相关的生物标志物，为早期诊断和治疗提供依据；药物代谢研究：蛋白质谱检测可用于研究药物在体内的代谢过程，揭示药物的药代动力学和药效学特征。

根据质谱检测原理，我们可以知道蛋白样本制备的过程至关重要，这决定了最终质谱结果的好与坏，而蛋白样本制备的关键就在于蛋白内切酶的选择了。

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产 品 推 荐

 

本产品是质谱分析前处理时常用的蛋白分解酶即赖氨酰肽链内切酶，该酶可以特异性切除赖氨酸基团C末端的多肽，可用于蛋白测序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶，可更好地切断赖氨酸基团的多肽，增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装，是方便使用的冷冻干燥品。20 μg/支可用于100-200个样品的凝胶内消化。

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应 用 实 例

 

分别采用胰蛋白酶（Tp）、赖氨酰肽链内切酶（Lys-C）和Tp与Lys-C 联用进行胶内酶切的效果比较。

牛血清蛋白BSA的条带（100 ng）通过SDS-PAGE获得，然后分别用Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp进行酶切，再用MALDI-TOFMS法进行分析。这些蛋白酶的实验效果见下表，这些结果表明Lys-C酶解的漏切位点数（Missed Cleavage）最少。Tp酶解时加入Lys-C后，漏切位点数有所降低，同时，可以鉴定出更多的多肽。

表1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp的结果对照

胰蛋白酶（Tp）（图 ａ）和赖氨酰肽链内切酶（Lys-C）+Tp（ 图 ｂ）

酶切后的质谱结果对照图。

Lys-C+Tp酶切后，可以在m/z=2000时得到吸收峰，而单独的Tp酶切在m/z=2000时没有吸收峰。该结果表明 Lys-C 可以提高测序覆盖度。

产品数据来源富士胶片和光(广州)贸易有限公司 

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/pdf/show/152.html